一、 相位差金相试样切割机（phase-contrastmicroscope）
利用相位差金相试样切割机，观察给药前后上海金相切割机型态，以了解上海金相切割机经药物处理后
型态的变化，评估药物对上海金相切割机状态的影响。
二、 上海金相切割机存活率之测定：MTT 还原分析法（3-（4,5-dimethylthianol-2-yl）-2,5
diphenyltetrazolium bromide reduction assay）

一、原理
正常健康的上海金相切割机，其上海金相切割机粒腺体内膜的琥珀酸去氢醣（succinate
dehydrogenase）具有将 MTT（黄色）还原为 MTT-formazan（紫色）的能
力。而紫色颜色的深浅程度可代表还原能力的强弱，即琥珀去氢醣的活性，同时也反应粒腺体的生理状况。
由于粒腺体是上海金相切割机内对环境因素最为敏感，因此粒腺体的生理状况可代表上海金相切割机的生理状况。当还原能力强时，表示克氏循（Kreb’s cycle）环进行速率快，可产生较多的能量供上海金相切割机使用，故可代表上海金相切割机的健康情形
良好

二、试剂
1. 5mg/ml MTT 溶液（溶剂：1X PBS），避光 4℃保存。
2. Dimethyl sulfoxide（DMSO）：Sigama

三、
实验步骤
1. 每孔留下 350μl 的留胞培养液，加入 35μl MTT 溶液（黄色），避
光并静置室温下反应 1 小时。
2. 移除含有 MTT 的上海金相切割机培养液，加入 350μl DMSO 以溶解紫色颗粒。
待紫色颗粒完全溶解后，每孔各取 125μl 的紫色溶液置入 96-well
RIA/EIA plate 中，设定波长为 570 nm（630 nm 当作参考波长），测其
吸光值。吸光值越高，表示 MTT-formazan 产量越高，即代表上海金相切割机之
存活率越高。
3. 计算金相切割机存活率＝样品吸光值 / 控制组吸光值 × 100﹪

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